مقاله کامل پايان نامه ارشد علوم گیاهی تغييرات محتواي آمينواسيدهاي آزاد، تركيبات فنلي و تركيبات ايميدازولي در دانه هاي در حال-UOHZIOFN

دانشگاه آزاد اسلامي
واحد گرگان
پايان نامه كارشناسي ارشد علوم گياهي(M.S )
موضوع:
تغييرات محتواي آمينواسيدهاي آزاد، تركيبات فنلي و تركيبات ايميدازولي در دانه هاي در حال رويش سويا (Glycine max L. cv. Pershing) تحت اثر تنش شوري اسمزي و ژيبرلين
استاد راهنما:
آقاي دكتر آرين ساطعي
استاد مشاور:
خانم دكتر مه لقا قربانلي
نگارش:
شهناز مبرا
شهريور 1385

تقديم به :
تقديم به استاد گرانقدر جناب پروفسور دكتر روستائيان .
سپاسگزاري:
فهرست مطالب
عنوان صفحه
چكيده
مقدمه
فصل اول
1-1 هدف
1-2 پيشينه تحقيق
1-3 روش كار و تحقيق
فصل دوم
2-1 كفشك زباني ماهيان (cynoglossidate tongue soles)
2-1-1 ريخت شناسي كفشك زباني ماهيان
2-1-2 گونه هاي موجود در ايران
2-2 جايگاه سيستماتيك كفشك زبان گاوي
(cynoglossidate mar crolepidotus )
2-2-1 ريخت شناسي كفشك زبان گاوي (largescale tonguesole)
2-2-2 محيط زيست
2-2-3 ارزش اقتصادي
2-2-4 اندازه و وزن
2-2-5 پراكنش
فصل سوم
3-1 چربي ها
3-2 اسيد هاي چرب
3-2-1 مشخصات عمومي اسيدهاي چرب
3-2-2 خواص اسيدهاي چرب
3-3 ساختمان و خواص انوع چربيها
3-3-1 چربي هاي خنثي (اسيل گليسرولها):
3-3-2 فسفوگليسيريدها
3-3-3 اسفنكوليپيدها و كليكوليپيدها
3-3-4 موم ها ( waxed)
3-3-5 ليپيدهايي كه صابون نمي شوند
3-4 روغن ماهي (Fish oil)
فصل چهارم
4-1 مصرف شده
4-2 وسايل آزمايشگاهي مورد نياز
4-3 دستگاههاي مورد نياز
4-4 روش
4-4-1 تهيه نمونه هاي كفكش ماهي
4-4-2 استخراج مواد طبيعي از كبد و بافت عضله هاي كفشك زبان گاوي
4-4-3 مراحل عملي استخراج به روش bligh and dyer
4-4-4 استخراج و خالص سازي چربي ها
در روش Bligh and dyer
4-5-1 انديس كواتس (Kovts index )
4-6 شناسايي مواد طبيعي موجود در فاز –n هگزاني كبد و بافت عضله كيش ماهي ميگويي(alepes djedaba) با استفاده از دستگاه :GC/MS
4-6-1 مشخصات دستگاه GC/MS مورد استفاده:
فصل پنجم
5-1 نتايج ، تفسير داده ها و شناسايي طيف هاي GC-MS
5-2 بحث
پيشنهادات
فهرست جداول
عنوان صفحه
جدول 5-1 تركيبات شناسايي شده در فاز كلروفرمي كبد ماهي كفشك زبان گاوي
جدول 5-2 نتيجه گيري كلي در مورد تركيبات شناسايي شده در كبد ماهي كفشك
زبان گاوي
جدول 5-3 تركيبات طبيعي شناسايي شده در فاز كلروفرمي بافت عضله هاي كفشك
زبان گاوي
جدول 5-4 نتيجه گيري كلي در مورد تركيبات شناسايي شده در بافت عضله ماهي
كفشك زبان گاوي
فهرست شكل ها
چكيده :
در اين تحقيق مواد طبيعي و اسيد هاي چرب موجود در بافت كبد و عضله هاي كفشك ( Cynoglossus Macrolepidotus ) معروف به زبان گاوي با استفاده از روش Bligh And Dyer ) استخراج گرديد .
براي شناسايي اين مواد ابتدا كلروفرم كه به عنوان حلال مورد استفاده قرار گرفته بود توسط دستگاه Rotary Evaporator تبخير و سپس مواد در –n هگزان حل گرديد و به دستگاه GC-MS تزريق شد . با استفاده از كروماتوگرام جرمي و طيف هاي جرمي بدست آمده مواد طبيعي و اسيدهاي چرب بافت كبد و عضله با محاسبه انديس كواتس و مقايسه آنها با انديس كواتس استاندارد و نيز بررسي داده هاي طيفي ( GC-MS ) و مقايسه آنها با داده هاي استاندارد موجود در مراجع (Eight-Peak ) شناسايي گرديد .
در كبد يازده تركيب شناسايي شد كه به Palmitic Acid با 98/14 درصد بيشترين مقدار مي باشد . ساير تركيبات شناسايي شده در كبد شامل Oleic Acid (30/12درصد) ، 1,3-Cycloocta Diene (97/7درصد) ، (E,E,E) 1,4,8-Dodecatiene (75/5 درصد)، q-Hexadecanoic Acid (39/5درصد)، 5,8,11,14-Eicosatetranenoic Acid (08/4درصد) ، Heptacosane (77/1درصد)،3-Heptadecan-5,yne (24/1)،my Ristic Acid (66/5درصد)مي باشد . تركيبات شناسايي شده در بافت
عضله شامل Plamitic Acid (15/4درصد) ، Methyl Eicosa-5,8,11,14,17-Pentanoat (51/23درصد) ،Stearic Acid (35/8درصد) ، Oleic Acid(68/5درصد) ، Nanan(74/6درصد) ، Decane(06/3درصد) مي باشد .
مقدمه :
اسيدهاي چرب اشباع نشده با چند پيوند دو گانه ( PUFA-Poly Unstrated Fatty Acids) از نوع اسيد هاي چرب omega-3 و اسيدهاي چرب omega-6 جزو اسيدهاي چرب ضروري براي بدن انسان هستند كه بدن انسان توانايي ساخت اين اسيدهاي چرب اشباع نشده را ندارد و بايد از طريق مواد غذايي تامين گردد .
اسيدهاي چرب omega-3 بيشتر در بدن ماهي و بخصوص ماهي هاي روغني مثل شاه ماهي ، ماهي خال مخالي، ساردين ، پليچارد، ماهي آزاد و ماكرل يافت مي شود .
اسيدهاي چرب امگا 3 شامل (ALA) Alpha – Linolenic Acid و دو مشتق آن با اسامي Decoshexaenoic Acid(DHA) و Eicosapentaenoic Acid(EPA) مي باشند .
در بدن ماهي ALA از طريق فعل و انفعالات بيوشيميايي EPA , DHA تبديل مي گردد . مشابه همين امر در بدن انسان نيز رخ مي دهد اما آنچه حائز اهميت است اين است كه ALA در بدن وجود نداشته و ساخته نمي شود ، بنابراين بايستي از طريق مواد غذايي(مثل ماهي و روغن ماهي كه يكي از منابع سرشار اسيدهاي چرب امگا 3 است ) به بدن برسد و همين نكته نشانگر ضرورت مصرف ماهي و غذاهاي دريايي مي باشد . [12] .
DHA براي عملكرد مغز، چشم و سيستم توليد مثل پستانداران ضروري است و تحقيقات اخير نشان مي دهد كه وجود آن به ميزان كافي در بدن باعث تعادل خلق و داشتن روحيه مثبت مي گردد .
EPA براي ساخته شدن پروستاگلايدينهاي ضروري براي عملكرد صحيح سيستم قلب و عروق حياتي هستند و در ساختمان غشاي سلولي نيز شركت مي كنند .
اسيدهاي چرب غيراشباع امگا 6 در روغن هاي گياهي مثل روغن آفتابگردان، روغن كنجد و روغن ذرت ، سويا و .. يافت مي شود [25] .
اسيدهاي چرب امگا 3 بازنجير كوتاه به نام اسيد آلفا لينولينك در روغن هاي گياهي خاصي مثل روغن برزك(كتاب) ، روغن كلزا(كانولا) و روغن گردو يافت مي شود[31].
اگر چه برخي از دانشمندان معتقدند بدن انسان مقاديري از امگا 3 موجود در روغن هاي گياهي را نياز دارد[21] .
ماهي يك منبع مهم است . گوشت ماهي منبع مهم پروتئيني و چربي به شمار مي رود و در مقايسه با ساير گوشت ها هضم راحتي دارد . روغن ماهي غني از ويتامين هاي D,A بوده و كبد ماهي يك منبع عظيم از ويتامين هاست . خوردن دو تا سه وعده ماهي در غذاي هفتگي بسيار موثر است .
براي استخراج چربي ها و از جمله اسيدهاي چرب از بافت هاي موجودات روشهاي مختلفي وجود دارد كه از جمله آن ها مي توان به روش استخراج ليپيدها با مخلوطي از هگزان و ايزوپروپانل ، روش ستون خشك ، روش Bligh and dyer و…اشاره كرد .
در اين پژوهش از روش Bligh and dyer استفاده گرديده است [20] .
هدف از انجام اين بررسي گامي در جهت شناخت تركيبات طبيعي موجود در بافت عضله و كبد گونه اي از ماهيان خليج فارس بنام ماهي كفشك با نام محلي زبان گاوي و نام انگليسي (largescale tonguesole) بوده است .
فصل اول
كليات
1-1 هدف
در سالهاي اخير تحقيقات وسيعي در مورد اثر تبليغات استفاده از ماهي و روغن ماهي انجام گرفته است .
نتيجه اين مطالعات اثرات مفيد آن را در بهبود و يا پيشگيري بسياري از بيماريها و نارسايي ها اثبات مي كند .
اين اثرات مثبت به دليل وجود اسيدهاي چرب اشباع نشده با چند پيوند دو گانه PUFA-(poly unsaturated fatty acdis) از نوع اسيدهاي چرب امگا 3 و اسيدهاي چرب امگا 6 در ماهي مي باشد .
اين اسيدها جزو اسيدهاي چرب ضروري براي بدن انسان هستند كه بدن انسان توانايي ساخت اين اسيدهاي چرب اشباع نشده را ندارد و بايد از طريق مواد غذايي (مصرف ماهي و آبزيان ) تامين گردند .
از فوايد و خواص ماهي و روغن ماهي مي توان به موارد زير اشاره كرد :
پيشگيري از بروز بيماري هاي قلبي و عروقي
افزايش تمركز و يادگيري
اثرات مفيد بر سيستم مغز و اعصاب
اثرات مثبت در افراد مبتلا به سرطان
كاهش ابتلا به بيماريهاي التهابي مانند آرتريت روماتوييد، آسم،پسوريازيس،اگزما،انواع آلرژي ها و…
كاهش سردردهاي عروقي و بيماري هاي كليوي
كاهش خطر سكته مغزي ، قلبي و انسداد رگ ها
كاهش درد و سختي مفاصل در بيماريهاي رماتيسم مفصلي
درمان خشكي چشم
كمك به كاهش وزن بدن(امگا 3 باعث بهبود بخشيدن به عملكرد تك تك سلولهاي بدن مي شود . )
كمك به گردش خون و ممانعت از لختگي خون در رگ ها
با تحريك تشكيل كلاژن موجب شادابي پوست مي شود.
اثرات مثبت روي سلولهايي كه بوسيله نيكوتين در افراد سيگاري از بين مي روند .
كاهش افسردگي در افراد
افزايش قدرت سيستم دفاعي بدن
تمامي عوامل ذكر شده و رشته تحصيلي ، نگارنده را بر آن داشت كه پژوهش حاضر را در راستاي شناسايي مواد طبيعي موجود در كبد و بافت عضله ماهي كفشك زبان گاوي (cynoglossus macrolepidotus) را به انجام رساند تا از اين طريق سهم كوچكي در تضمين سلامتي هموطنان خود داشته باشد .
1-2 پيشينه تحقيق
روغن ماهي منبع سرشاري از اسيدهاي چرب غير اشباع(PFUA) و ويتامين هاي محلول در چربي است و داراي خواص دارويي و صنعتي قابل توجهي مي باشد . كاربردهاي اين روغن تا قبل از سال 1956 ميلادي بيشتر در موارد صنعتي از قبيل صنايع چرم ، صابون ، رنگ ، مارگارين و… بوده است ولي از آن زمان به بعد با پي بردن به ارزش دارويي روغن ماهي تحقيقات وسيعي در زمينه آن انجام گرفته است . وجود اسيدهاي چرب غيراشباع به خصوص از خانواده -3 و ويتامين هاي محلول در آن باعث شده كه اين روغن نقش مهمي در درمان بيماريهاي قلبي و بعضي از سرطان ها ، درد مفاصل ، آسم و… و به طور كلي افزايش سيستم دفاعي بدن در مقابل بيماريها داشته باشد .
در سال 1958، مطالعات Zutphen اولين سري مطالعاتي بود كه رابطه معكوس بين مصرف ماهي و بيماري هاي قلبي را نشان داد .
(Daviglus , M.L.,1997,Hu,F,B.,etal.,2003,Dolecek,T.A.,1991)
Gurr در سال 1993 در انگلستان به بررسي توصيفي تاثير اسيدهاي چرب -3روي چربي هاي خون پرداخته است .
مهمترين تاثير اسيدهاي چرب -3 روغن ماهي ، كاهش دادن VLDL پلاسما مي باشد . چون اين ذرات غني از تري گليسيريد هستند بنابراين تاثيرعمده اسيدهاي چرب -3 روي كاهش غلظت گليسيريد پلاسما مي باشد .(Gurr,M.,1993)
بسياري از مطالعات ديگر نشان داده اند كه مصرف متوسط PUFA از نوع n-3 مقدار تري گليسيريد پلاسماي بيماران و افراد سالم را پايين مي آورد . همچنين تحقيقات نشان داده اند كه رژيم غذايي سرشار از MUFA كه در روغن ماهي فراوان يافت مي شود مقدار كلسترول تام و كلسترول LDL پلاسما را كاهش مي دهد اما موجب كاهش HDL نمي شود (Gurr,M.,1993) .
اسيدهاي چرب ضروري (EFAS) شناخته شده ترين تركيبات مفيد براي بيماريهاي قلبي – عروقي است . در نوامبر 2002، انجمن قلب آمريكا توصيه هايي در خصوص سلامتي بزرگسالاني كه حداقل هفته اي دوبار ماهي مي خورند ( بخصوص ماهي حاوي مقادير زياد DHA,EPA) ، منتشر نمود. (Kris-Etherton,P.M.,etal.,2002.,Carroll,D.N., Etal.,2002) بيشترين توجه روي اسيدهاي چرب ، ناشي از مطالعات انجام گرفته در سال 1975 بر روي اسكيموهاي گرينلند بود . محققين مغايرت مصرف زياد چربي در رژيم غذايي اسكيموها و پايين بودن نرخ بيماريهاي قلبي- عروقي را كشف كردند (Dyerberg,J.,Etal.,1987) در بررسي و تحقيق انجام گرفته در سال 2001، محققان دريافته اند كه جايگزين نمودن 10% از چربي اشباع شده در رژيم غذايي موش صحرايي با روغن گل گاو زبان و روغن نوعي پامچال وحشي(Epo)، اثرات بازدارنده در افزايش كلسترول كل و غلظت كلسترول LDL دارد . ( Fukushima,M.,etal.,2007) .
مطالعات ديگر نشان داده است كه مصرف روغن ماهي در كاهش بيماري فشار خون به ويژه در بزرگسالان موثر مي باشد .
(Geleijnse,J.M.,et.,2002,Appel,L,J.,1999,Toft,I.,et.,1995)
مقادير كم اسيد چرب امگا-3 در درمان بيماري افسردگي بكار مي رود. طي بررسي بعمل آمده در سال 2002، محققين دريافتند كه با مصرف يك گرم در روز EPA، افسردگي طويل المدت بيماران بهبود مي يابد .
(peet,M.,eral.,2002,maes,M.,etal.,1999,Nruinsma,k.,A.,etal.,2000)
عوارض پوستي نظير اگزما، التهابات پوستي نشان داده اند كه با اسيدهاي چرب ضروري (EFA) ، به ويژخ GLA ( گامالينولينگ اسيد) قابل درمان هستند .
(chung,s.,etal.,2002,horrobin,D.F.2000) مكانيسم عمل GLA در جهت كمك به عوارض پوستي ناشناخته است . تحقيقات انجام گرفته در دانشگاه Inha كشور كره ؛ روشن ساخت كه استفاده از Epo (روغن ماهي پامچال وحشي) التهاب و زخم هاي پوستي را بهبود مي دهد . لذا محققين به اين نتيجه رسيدند كه ماده GLA موجود در EPO احتمالا با سيستم ايمني بدن در ارتباط است . (Yoon,s.,ETAL.,2002) .
امگا-3 در معالجه بيماران رواني نيز بسيار موثر است . محقيقن در تحقيقات ديگر به اين نتيجه رسيده اند كه LCPUFAS ( اسيدهاي چرب اشباع نشده با زنجير طولاني) براي رشد و پيشرفت كودكان نيز ضرروي است . حتي در بزرگسالان تحقيقات كلينيكي نشان داده است كه Lcpufas در جلوگيري از خونريزي مغزي ، حفاظت و سلامت بيشتر مغز و بزرگتر شدن آن دخالت دارد . (lavque,E.,etal.,2002) .
غير از EFAS ( اسيدهاي چرب ضروري)، چربي هاي ديگري نيز هستند كه براي سلامتي انسان مفيدند . CLA(اسيدهاي لينولئيك مزدوج) از نظر ساختاري شبيه به لينولئيك اسيد (LA) از خانواده امگا-6 است ، اگر چه CLA دو پيوند دوگانه دارد كه در موقعيت هاي مختلفي قرار دارند . LA دو پيوند دوگانه در موقعيت كربنهاي 9و12 از طرف دم دارد .
دو ايزومر فعال CLA پيوندهايي در Trans-11.cis-9 و trans-10 و cis-12 دارد.
CLA شامل اثرات بيولوژيكي فراواني است . مطالعات در جانوران و انسان ها نشان داده است كه جايگزيني CLA باعث كاهش چربي بدن و افزايش مقدار عضلات كم چرب مي شود. افزايش عضلات كم چرب ، يكي از بارزترين ويژگي هاي افراد ورزشكار است . CLA توانايي سلولهاي چربي را براي بالا بردن چربي خون كاهش مي دهد و مانع از تشكيل سلول هاي چربي ديده مي شود. اسيد لينولئيك مزدوج نيز به سوختن چربي ها تا حد زيادي كمك نموده و اين امر منجر به كاهش چربي و افزايش مقدار ماهيچه ها مي گردد
(Blankson,H.,et al.,2002) .
CLA در درجه اول يك معرف بازدارنده شيميايي ، در جلوگيري از بيماري سرطان سينه است جنبه مثبت ديگري از CLA ، تاثير بر متابوليسم چربيها است . محققان با تحقيقات انجام شده در موش هاي صحرايي دريافته اند كه CLA در رژيم غذايي ، غلظت چربيهاي كبد را از طريق پايين آوردن سنتز تري گليسريدها و افزايش اكسيداسيون اسيدهاي چرب كاهش داده است .
(Rahman,S.M.,et al.,2002)
مغز يكي از اندام هايي است كه نياز به اسيد چرب غير اشباع امگا- 3 دارد . بافت اين اندام به ويژه غني از DHA است ، كه ارتباط نزديكي بين مصرف اين اسيد چرب و رسوباتش در غشاء سلولي نشان مي دهد .
(Rapoport,S.I.,etal.,2007)
با توجه به اثرات مفيد و سودمند و توصيه مي شود مادران آينده ، ماهي را در رژيم غذايي شان به عنوان منبعي از اسيدهاي چرب غيراشباع وارد نمايند .
(koletzko,B.,etal.,2007 ) .

فایل : 76 صفحه

فرمت : Word